Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒常见问题及答案

又是一年科研高峰期，很多老师和同学们用上了碧芯生物的Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒，也咨询了很多问题，在这里，我们把问题总结一下，统一回复大家

一检测项目部分常见问题

1 Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒可以检测哪些细胞因子？




目前碧芯生物研发了人类和小鼠细胞因子的联检试剂，检测指标如下所示
Beadstar-mPlex®人类多细胞因子联检试剂盒（12种）：IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-5、IL-8、IL-12p70、IFN-α2
Beadstar-mPlex®小鼠多细胞因子联检试剂盒（10种）：IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、MCP-1、IFN-γ、TNF-α、IL-12p70、IL-1β




2 如果只检测几种，能否用Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒？

可以，我们这个联检试剂是可以灵活组合的，可以根据检测目的，自由选择几种细胞因子联合检测（前提是在我们所提供的细胞因子范围内进行选择，见题1）。试剂盒也是根据需要检测的细胞因子数量来定价的。

二 样本制备部分常见问题

1 检测需要提供样本是什么，需要多少检测样本量？

样本：细胞培养上清、血清

所需样本量：血清（25-50 μL）；细胞上清（25-50 μL）

2 要使用Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒对流式细胞仪有什么要求？

流式细胞仪需要有PE，APC ,APC-CY7 3个荧光通道。

3 是不是每次实验都要使用一瓶新的标准品？

标准品在配成溶液后不稳定， 在配制成溶液的12小时后将不能再使用，在每次实验前都要重新配置新的标准品溶液。Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒（50T）会配置1管标准品，Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒（100T）会配置2管标准品。此外，也有单独的标准品可以购买。

4 需不需要振动混合捕获微球？

在使用之前 捕获微球必须充分的振动混合， 从微球混合液试管中分到，每一个实验管之前， 直至在送到仪器进行上样检测之前 反应管都必须充分振动混合， 这是由于充分的振动能够防止微球聚集成团， 若混合不足会导致在进行样品分析时候出现检测到很少或者没有检测到微球的情况 ，因此在使用流式细胞仪分析标准品或者样品之前， 必须充分振荡混合微球， 试验管在放置到流式细胞仪上检测前需要振荡混合3-5秒钟， 这样在FL3通道里面能够更好的分辨出带有不同标志的微球。

三 上机检测部分常见问题

为什么实验结果样品都显示高度的阳性？

可能是因为样品的浓度太高 请对您的样品, 进行不同稀释度的检测， 如果所有样品都显示阳性或者高于标准品的最高浓度读数， 这时候请对您的样品进行进一步的稀释 因为您的样品的浓度已高于本系统的正常检测范围。

四 结果分析常见问题

1 Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒检测结果是否可直接与ELISA的分析结果进行对比?

不可以，Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂盒是基于流式荧光法的，虽然流式荧光法检测体系相对于ELISA分析具有良好的优势 能够提供更高的敏感性和更大的浓度检测范围， 但是两者得出的实验数据不能够直接比较。需对Beadstar-mPlex®多细胞联检试剂检测到的数据通过和已有的ELISA数据进行校正，得到两者的相关性结果。

2 标准品和/或样本的平均荧光强度过低的原因是什么？

1) 反应温度低 2) 反应时间短 3) 样本过度稀释4) 孵育过程中未避光

3 联检细胞因子的检测线性范围一致吗

不一致，每一种细胞因子都有对应的检测范围（见说明书，试剂盒说明书上有详细说明）。我们不建议研究者根据标准曲线外推低于标准曲线值的实验报告数值。